關于細胞凋亡流式分析,細胞凋亡流式圖分析這個問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現在讓我們一起來看看吧!
1、在二維散點圖上,PI 和 annexin V 分別是X和Y軸。
2、一般認為PI單染的細胞是已經死亡的細胞,annexin V 單染的細胞是凋亡早期的細胞,而雙染是凋亡中期的。
3、需要在散點圖上先畫出4個象限,位置根據無染色的陰性細胞先定出左下象限。
4、Annexin V是一種檢測細胞凋亡的試劑,在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質雙層的內側,細胞發(fā)生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。
5、擴展資料:用標記了FITC的AnnexinⅤ作為熒光探針,利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發(fā)生,正常細胞和早期凋亡細胞的細胞膜是完整的。
6、檢測annexin V-FITC單染的細胞并檢查FL1-FL2(或FL3)散點圖,保證在左上和右上象限內沒有顆粒。
7、如果有顆粒出現在上端象限則說明有熒光滲漏;此時FL1的熒光被FL2 (或FL3)PMT檢測到了。
8、為了糾正這種現象,增加FL1漏到FL2(或FL3)熒光的補償%(這可能在1-5%之間)。
9、如果這個調節(jié)沒有有效地去除FL2的陽性信號,此時要降低FL2(或FL3) PMT的電壓。
10、參考資料來源:百度百科-Annexin V。
本文分享完畢,希望對大家有所幫助。
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