通過以往的超數(shù)排卵誘導(dǎo)方法獲得的轉(zhuǎn)基因小鼠(敲除小鼠)的卵子平均數(shù)量約為20個(gè),但實(shí)際上數(shù)量通常要少得多,約為10個(gè)或更少。然而,熊本大學(xué)的研究人員開發(fā)了一種超數(shù)排卵的方法,成功地從一只雌性老鼠體內(nèi)排出了100個(gè)卵子。
通過體外受精和胚胎移植,已經(jīng)證實(shí)了正常的2細(xì)胞胚胎生長和來自這些卵子的后代。預(yù)計(jì)這一成果將成為未來大規(guī)模生產(chǎn)敲除小鼠非常有用的技術(shù)。
誘導(dǎo)超數(shù)排卵的方法是由熊本大學(xué)動物資源與發(fā)展中心(CARD)生殖工程系的Naomi Nakagata教授和Torutako博士開發(fā)的。結(jié)果于2015年5月29日在PLOS ONE上發(fā)布。
最近發(fā)現(xiàn),編碼人類蛋白質(zhì)的基因數(shù)量不到人類基因組的2%,數(shù)量超過2萬個(gè)。科學(xué)界用敲除小鼠分析基本表型(遺傳特征的出現(xiàn))來分析如此大量基因的功能。因此,有必要有效地產(chǎn)生敲除小鼠。
在誘導(dǎo)超數(shù)排卵的常規(guī)方法中,將妊娠母馬血清促性腺激素(PMSG)(卵泡刺激素(FSH))應(yīng)用于敲除小鼠以發(fā)育大量卵泡。然而,從雌性老鼠身上獲得的卵子實(shí)際數(shù)量最多限于30個(gè)。
Nakagata教授和他的同事們提出了在超數(shù)排卵過程中加入抑制素抗血清的想法。激素抑制素在性腺發(fā)育過程中釋放,是卵泡刺激素的分泌調(diào)節(jié)劑。卵泡刺激素是由垂體分泌的,這限制了排卵期間產(chǎn)卵的數(shù)量。抑制素抗血清的使用可以通過中和雌性敲除小鼠體內(nèi)的抑制素來促進(jìn)卵泡刺激素的過量分泌。此外,通過同時(shí)應(yīng)用PMSG,小鼠產(chǎn)生了大量的卵泡,導(dǎo)致敲除小鼠成功排卵100個(gè)或更多的卵,這大約是常規(guī)方法的3-4倍。
“利用我們新開發(fā)的方法,用于采卵的雌性敲除小鼠數(shù)量可減少1/3-1/4或更少?!蔽浞虿┦空f,他參與了該計(jì)劃的開發(fā)?!皽p少實(shí)驗(yàn)動物數(shù)量是實(shí)驗(yàn)動物福利最重要的支柱之一。不僅是從生命科學(xué)研究的角度,更是從社會對實(shí)驗(yàn)動物福利的關(guān)注。這一結(jié)果非常有意義,我們希望這一成就將有助于促進(jìn)各種國際知名的研究?!?
通過允許少數(shù)雌性小鼠大量排卵,試管嬰兒和胚胎移植可以更容易地進(jìn)行。因此,可以提高收集、儲存和提供敲除小鼠的效率。
Nakagata教授預(yù)測,他的超數(shù)排卵誘導(dǎo)方法對大鼠、倉鼠和豚鼠具有很高的潛力,但尚未確定。他希望很快將這種方法的范圍擴(kuò)大到其他實(shí)驗(yàn)動物。
計(jì)劃未來從合作制藥公司釋放排卵誘導(dǎo)劑。
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