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研究人員利用冷凍電子顯微鏡推進(jìn)乳腺癌 卵巢癌研究

導(dǎo)讀 使用先進(jìn)的成像技術(shù),梅奧診所的科學(xué)家們對 BRCA1-BARD1 蛋白復(fù)合物提供了前所未有的了解,該蛋白復(fù)合物通常在乳腺癌或卵巢癌患者中發(fā)生

使用先進(jìn)的成像技術(shù),梅奧診所的科學(xué)家們對 BRCA1-BARD1 蛋白復(fù)合物提供了前所未有的了解,該蛋白復(fù)合物通常在乳腺癌或卵巢癌患者中發(fā)生突變。他們的論文發(fā)表在Nature 上,確定了 BRCA1-BARD1 如何發(fā)揮作用的各個(gè)方面,支持未來的轉(zhuǎn)化研究、癌癥預(yù)防工作和藥物開發(fā)。

“BRCA1-BARD1 對 DNA 修復(fù)很重要。它與癌癥直接相關(guān),因?yàn)樵诎┌Y患者中發(fā)現(xiàn)了數(shù)百個(gè) BRCA1 和 BARD1 基因突變,”梅奧診所結(jié)構(gòu)生物學(xué)家和生物化學(xué)家 Georges Mer 博士說誰是論文的主要作者。“但沒有人知道這些突變或未知意義的變異是否易患癌癥,因?yàn)槲覀儾恢肋@些變異是否位于對功能很重要的 BRCA1-BARD1 區(qū)域?,F(xiàn)在因?yàn)槲覀兛梢钥吹饺绾蜝RCA1-BARD1 起作用,我們很清楚 BRCA1-BARD1 的哪些區(qū)域?qū)δ芎苤匾?rdquo;

在細(xì)胞中,DNA 和組蛋白的復(fù)合物復(fù)合成所謂的染色質(zhì),并包裝成稱為核小體的束。DNA 損傷反應(yīng)蛋白需要接近染色質(zhì)來修復(fù)受損的 DNA。BRCA1-BARD1 有助于修復(fù)斷裂的 DNA 鏈,這有助于細(xì)胞的維持和存活。但如果這是癌細(xì)胞用來在化療中存活的策略,那么它也是一種可能被阻斷或失活的功能。

冷凍電子顯微鏡和核磁共振波譜

“我們使用了兩種技術(shù)——冷凍電子顯微鏡和核磁共振波譜——以接近原子的分辨率來了解 BRCA1-BARD1 如何與核小體、染色質(zhì)的重復(fù)單位以及 BRCA1-BARD1 如何修飾染色質(zhì),”博士解釋說。梅爾。

在冷凍電子顯微鏡中,純化的 BRCA1-BARD1 與核小體結(jié)合,統(tǒng)稱為大分子,被快速冷凍,然后使用電子顯微鏡成像。大分子在樣品中以各種方式定向,因此計(jì)算機(jī)程序評估所有定向數(shù)據(jù)以創(chuàng)建 3D 結(jié)構(gòu)。Mer 博士和他的團(tuán)隊(duì)還使用核磁共振波譜檢查了 BRCA1-BARD1 核小體復(fù)合物,該波譜使用強(qiáng)磁鐵探測大分子內(nèi)原子的相對位置。使用這些成像工具,科學(xué)家們可以將 BRCA1-BARD1 可視化,并揭示該復(fù)合體的新功能。

“我們展示了 BRCA1-BARD1 如何將泛素附著到核小體上,但我們還確定 BRCA1-BARD1 識別已經(jīng)附著在核小體上的泛素,這是 DNA 斷裂的信號,”Mer 博士說。“我們發(fā)現(xiàn)了一種意外的串?dāng)_,BRCA1-BARD1 對泛素的識別增強(qiáng)了其泛素附著活性,這有助于我們更好地了解 BRCA1-BARD1 如何發(fā)揮其功能。”

研究人員根據(jù)冷凍電子顯微鏡數(shù)據(jù)制作了一段視頻,以顯示蛋白質(zhì)復(fù)合物與核小體相互作用的位置。

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